近日,河南农业大瓜类分子育种团队在Physiology and Molecular Biology of Plants发表了题为“Validation of CRISPR construct activity and gene function in melon via a hairy root transformation system”的研究论文。研究团队利用发根农杆菌K599为工程菌,甜瓜子叶为外植体建立了甜瓜毛状根转化系统。整个流程简洁高效,可在一个月内获得甜瓜转基因毛状根,转化效率达到68.61%。
研究团队利用该体系选择了甜瓜的四个重要基因(
CmERECTA、
CmTCP1、
CmACS7和
CmBRC1)进行CRISPR靶点验证。根据编辑结果,他们将靶点分为
完全编辑、部分编辑、无编辑等三种类型。最后团队利用该体系对甜瓜
CmRHL1基因进行敲除,发现该基因被敲除后甜瓜的根毛不能形成。
这套毛状根转化系统为甜瓜基因编辑研究提供了强有力的工具,不仅能快速验证CRISPR/Cas9载体活性,还能高效进行根系发育相关基因的功能分析,为甜瓜分子育种提供了重要的技术支撑。
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胡建斌教授和风景园林与艺术学院李永华教授为论文通讯作者,新葡京娱乐
教师李翔和硕士研究生曹晨晨为论文共同第一作者,本研究得到国家自然科学基金项目和河南省科技攻关项目的资助。